Гост 56236-2014

У нас вы можете скачать гост 56236-2014 в fb2, txt, PDF, EPUB, doc, rtf, jar, djvu, lrf!

Степень токсичности проб водных вытяжек отработанных буровых растворов донных отложений. Значение эффективной кратности разбавления проб водных вытяжек отработанных буровых растворов донных отложений 96 ч ЭКР , разы. Таблица 4 - Степень токсичности проб водных растворов веществ. Степень токсичности проб водных растворов веществ. При необходимости, условия, в которых проводились отстаивание, фильтрование, а также размораживание пробы; - для веществ - анализируемые концентрации, способ их приготовления; - наименование и способ культивирования тест-организмов; - значение рН анализируемых проб перед тестированием и после тестирования; сведения о регулировании рН проб при необходимости ;.

Помещение с контролируемым температурным режимом или климатическая камера. Тест-контейнеры и емкости из химически инертного материала и достаточной вместимостью например, стеклянные пробирки и стаканы.

Пипетки для отбора тест-организмов достаточным диаметром для захвата тест-организмов , позволяющие захватить лишь малое количество среды. Микропипетки из инертного пластика с луковицей на конце.

Емкости для отбора проб. Сита сетки 1,0 и 0,3 мм , которые могут быть использованы для перемещения взрослых тест-организмов в маточную культуру и позволяют отделить молодь от взрослых.

Примечание - Методы культивирования дафний приведены в B. Модельный токсикант - по 5. Примечание - Двухромовокислый калий K Cr O является канцерогенным веществом, которое может быть токсично при вдыхании; использование коммерчески доступных растворов с заданной концентрацией K Cr O для приготовления исходного раствора эталонного вещества может снизить риск вдыхания токсичной пыли в лаборатории.

Культивационная вода, приготовленная в соответствии с требованиями приложения Е. Калий хлористый по ГОСТ , х. Натрий углекислый однозамещенный по ГОСТ , х. Кислота борная по ГОСТ , х. Примечание - Проверку физиологической чувствительности тест-организмов по отношению к модельному токсиканту двухромовокислому калию проводят по 5.

При этом используют данные, приведенные в таблице А. При проведении тестирования рекомендуется использовать одинаковые емкости. Пример проведения предварительного тестирования пробы сточной воды и установления диапазона кратности разбавлений концентраций пробы, в пределах которого необходимо проводить окончательное тестирование, приведен в А. Тестирование проводят в четырех емкостях как в анализируемой, так и в контрольной пробе.

Пример проведения окончательного тестирования пробы сточной воды для определения значения средней эффективной кратности разбавления 48 ч ЭКР приведен в А. Объем анализируемой пробы должен быть таким, чтобы при использовании необходимого количества тест-организмов их плотность не превышала одного организма на 10 см пробы.

Допускается максимальная плотность посадки - один тест-организм на 2 см анализируемой пробы. При необходимости определяют минимальное неэффективное разбавление LID.

Пример определения минимального неэффективного разбавления LID для сточной воды приведен в приложении D. При этом результаты испытаний считают достоверными если: Продолжи- тельность тестирования, ч.

Количество выживших тест-организмов в емкостях, шт. Среднеариф- метическое значение количества выживших тест-организмов, шт. По результатам тестирования, приведенным в таблице А.

В этом случае для обработки результатов тестирования применяют пробит-анализ по A. Следовательно, использованные тест-организмы пригодны для тестирования. Продолжи- тельность тестиро- вания, ч. Количество выживших тест- организмов в емкостях, шт. Среднеарифметическое значение количества выживших тест- организмов, шт. Из данных таблицы А. Среднеарифмети- ческое значение количества выживших тест-организмов, шт. Среднеарифме- тическое значение количества выживших тест- организмов, шт.

Десятичный логарифм кратности разбавления lg C. Примечание - Данные, приведенные в настоящей таблице, получены в результате тестирования анализируемой пробы сточной воды по методу А в течение 96 ч. Пример построения графика линейной зависимости значений пробитов от десятичного логарифма кратности разбавлений lg С на примере сточной воды приведен на рисунке А. Из точки пересечения прямой с графиком М опускают перпендикуляр на ось абсцисс и получают значение lg C, равное 1,46, соответствующее 96 ч ЭКР.

Примечание - Для количественной оценки токсичности и определения токсикологических показателей допускается применение пробит-анализа с использованием компьютерных программ. Количество не потерявших подвижность тест-организмов, шт. Количество не потерявших подвижность тест-организмов в емкостях, шт. Общее количество не потерявших подвижность тест- организмов, шт. В этом случае для обработки результатов тестирования применяют графический метод определения значения 48 ч ЭКР , как указано ниже.

На оси ординат откладывают точку, соответствующую значению 48 ч ЭКР и из нее проводят прямую, параллельную оси абсцисс до пересечения с прямой АЕ и находят точку N. Допускается использовать пробит-анализ см. Чувствительность культур к модельному токсиканту должна соответствовать установленному в настоящем стандарте диапазону ЭК за 24 ч методы А и B. При этом обеспечивают естественное или искусственное освещение так, чтобы соблюдались следующие периоды выдержки: Тест-организмы Daphnia magna Straus необходимо защищать от воздействия прямого солнечного света.

Тест-организмы и культивационная вода, в которой проводят их культивирование, должны содержаться в емкостях только из стекла или полимерного материала, изготовленного без использования пластификатора.

Тест-организмы можно культивировать постоянно в лабораторных условиях. Новорожденные дафнии выпускаются непосредственно из яйцевого мешка женской особью Daphnia magna Straus в течение сут. Примечание - Культивационную воду готовят по 5. В течение ч накопившиеся новорожденные тест-организмы переносят пипеткой в отдельный сосуд с культивационной водой и используют для тестирования.

Предварительную адаптацию к культивационной воде неонатов Daphnia magna Straus не проводят. Емкости для культивирования заполняют на объема культивационной водой и помещают туда самок дафний среднего размера с выводковыми камерами, заполненными эмбрионами и неплотно прикрывают пластинами из стекла или оргстекла толщиной не менее 6 мм от попадания пыли и для уменьшения испарения.

Для пересадки в емкости для культивирования допускается отбирать взрослых самок с использованием фильтрования культуры через крупное сито с отверстиями размеров ячеек мкм. Маточную культуру Daphnia magna Straus поддерживают в одной или двух емкостях. Ежедневно с поверхности воды емкостей, в которых культивируют тест-организмы, марлевой салфеткой снимают дрожжевую и бактериальную пленку. После этого воду вместе с рачками осторожно переливают в чистую емкость так, чтобы накопившийся осадок остался на дне.

В чистую емкость добавляют свежую культивационную воду. Таким способом, ежедневно проводят очистку поверхности воды и дна емкости, в которой культивируются рачки.

Кормление маточной культуры дафний осуществляют ежедневно в соответствии с требованиями п. Аэрирование воды в емкостях с дафниями при культивировании не допускается. Один или два раза в неделю осуществляют пересадку маточной культуры в свежую культивационную воду. Частоту пересадки определяют плотностью маточной культуры и содержанием растворенного кислорода в культивируемых емкостях плотность маточной культуры особей на 1 дм культивационной воды.

Не допускается использование молоди маточной культуры для тестирования. Появившуюся молодь в необходимом количестве отсаживают в отдельные емкости от поколения к поколению. Когда вновь народившиеся тест-организмы начинают размножаться, материнские особи удаляют. Каждое поколение маркируют и на емкости ставят дату рождения. Одновременно в лаборатории содержат культуры двух поколений.

При культивировании и проведении токсикологических опытов необходимо поддерживать непрерывное партеногенетическое размножение тест-организмов, учитывая особенности биологического цикла их развития. Длительное культивирование тест-организмов в лабораторных условиях позволяет устанавливать пределы изменчивости основных биологических показателей в зависимости от сезона.

В оптимальных условиях содержания выживаемость тест-организмов не зависит от времени года. Средние значения плодовитости за 30 сут составляют от 60 до экземпляров молоди на одну самку за это время получают пометов. Могут наблюдаться повторяющиеся снижения плодовитости тест-организмов в зимний ноябрь-январь и летний июнь-июль периоды. Длительность культивирования тест-организмов в лаборатории в оптимальных условиях даже в течение 10 лет не влияет на результаты опытов.

Для этого в воду, в которой культивируют Daphnia magna Straus, минерализация которой известна, постепенно порциями добавляют хлористый натрий. В дальнейшем достигнутый уровень минерализации среды поддерживают постоянно.

Эта же среда служит контролем при тестировании и в качестве воды для разбавлений. Адаптированную культуру Daphnia magna Straus к повышенному содержанию солей нельзя использовать для тестирования вод с более низкой минерализацией.

Оптимальные значения культивационной воды рН составляет 7,,0, однако временные изменения рН в пределах 5,,0 не подавляют существенным образом жизнедеятельность тест-организмов. Эти водоросли выращивают с использованием асептической технологии, чтобы исключить заражение культуры бактериями, водорослями и простейшими организмами. Для выращивания водорослей Scenedesmus qvadricauda и Chlorella vulgaris используют питательную среду Прата.

Исходные растворы N 1 - N 4 для приготовления питательной среды Прата готовят на дистиллированной воде из реактивов, вносимых в количествах, приведенных в таблице В. Питательную среду Прата готовят следующим способом: После охлаждения через 24 ч добавляют 1 см исходного раствора N 4, снова перемешивают, плотно закрывают ватно-марлевой пробкой и колпачком.

Культивирование водорослей для кормления тест-организмов проводят следующим способом: В качестве дополнительного корма для маточных культур дафний используют сухие пекарские дрожжи. Для приготовления суспензии берут 1 г сухих дрожжей и растворяют в см дистиллированной воды.

Суспензию дрожжей хранят в холодильнике не более 3 сут. Допускается использовать и другие питательные среды например, Успенского N 1 или Тамия. Характеристики используемых питательных сред приведены в таблице В. Примечания 1 Состав раствора N 1: Объем каждого из добавляемых растворов N 1 и N 2 в питательную среду составляет 1 см. Растворы солей микроэлементов можно добавлять во все среды независимо от того, указано это в прописи или нет.

Примечание - Исходная плотность культуры должна быть на уровне культуры, используемой в опыте. Например плотность культуры 25 тест-организмов в 1 дм можно использовать для проведения опытов с 5 тест-организмами в см опытного раствора.

Культуру Daphnia magna Straus следует кормить одноклеточными водорослями Scenedesmus qvadricauda или Chlorella vulgaris из лабораторной культуры. Водоросли для корма должны быть в экспоненциальной фазе роста. Культивируемые для кормления Daphnia magna Straus одноклеточные водоросли можно использовать до тех пор, пока они не будут проявлять признаков нарушения деградации популяции.

Кормовые водоросли не следует хранить долгое время при комнатной температуре, так как это приведет к ухудшению состояния культуры водорослей. Ее следует хранить в холодильнике в темноте или даже можно заморозить и кормить дафний до тех пор, пока не ухудшится их состояние и снизится репродукция. Нельзя допускать передозировку при кормлении. Культура Daphnia magna Straus должна получать 0,,2 мг углерода в расчете на 1 организм в день. Для того чтобы избежать попадания среды культивирования водорослей в культуру дафний, рекомендуется отделить водоросли от культуральной среды и перенести их в среду культивирования дафний.

При выращивании маточной культуры Daphnia magna Straus необходимо поддерживать постоянный режим культивирования. Среду следует менять, не менее чем раза в неделю. Переносят взрослых особей в чистый сосуд с новой средой и отделяют вылупившиеся тест-организмы от взрослых особей. Удаляют шкурки тест-организмов, сбрасываемые при линьке, мертвых или обесцвеченных животных, а также остатки корма. Культивирование Daphnia magna Straus осуществляют при рассеянном дневном свете или искусственном освещении с периодичностью свет - темнота соответственно 16 и 8 ч.

Однако в интенсивных культурах дафнии размножаются только бесполым способом, при этом рождаются только диплоидные самки. Взрослые дафнии выметывают партеногенетические яйца, которые развиваются в дорзальной спинной выводковой камере, из которых получается живое потомство. В процессе роста молодь дафний проходит последовательные ювенильные стадии рисунок В. При определенных условиях внешней среды которые в научной литературе называют "стрессовые" дафнии переходят от бесполого к половому способу размножения, в результате чего образуются гаплоидные самцы, а также гаплоидные яйца, которые оплодотворяются самцами.

В дальнейшем у самок образуется защитное дорзальное седлышко эфиппиум , в котором размещаются два оплодотворенных яйца покоящиеся или зимние яйца.

Зимние яйца обычно проходят стадию покоя она может занимать несколько месяцев , в течение которой яйца не реагируют ни на какие внешние воздействия, стимулирующие эмбриональное развитие и рождение неонатов. Эфиппиумы сохраняют и обеспечивают получение необходимого биологического материала к моменту проведения токсикологических опытов. Для культивирования дафний с целью получения зимних яиц используют любые емкости подходящего объема в зависимости от количества требуемых для опыта эфиппиумов.

Культивирование и кормление дафний осуществляют таким же способом, как при выращивании лабораторной культуры. Получают зимние яйца из той же популяции дафний. Переход от бесполого к половому размножению обеспечивается двумя факторами: Точные значения этих двух факторов и длительность перехода от бесполого к половому размножению полностью зависят от специфических конкретных условий культивирования и определяются экспериментальным путем.

Начало полового размножения можно определить с помощью регулярных микроскопических наблюдений за культурами, в которых появятся самцы они меньше самок , а также самки с эфиппиумами. После того, как самки сбросили свои эфиппиумы, последние можно собрать на дне сосуда для культивирования. С учетом фазы покоя зимние яйца после вымета хранят в течение 3 мес, чтобы получить жизнеспособное потомство.

Живые неонаты получают даже спустя года при условии, что зимние яйца хранили при оптимальных условиях. В лабораторных условиях продолжительность развития оплодотворенных яиц до появления неонатов составляет 72 ч.

Для получения неонатов эфиппиумы переносят в чашку Петри с той же культивационной средой, которая описана выше для культивирования дафний.

Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений. Примечание - Данные для Daphnia magna Straus приведены по результатам тестирования в течение 24 ч.

Уровень разбавления D представляет собой обратное значение объемной доли сточной воды в анализируемом объеме [например, если соотношение содержания сточной воды и воды для разбавления составляет 1: При тестировании для определения LID используют по 10 дафний в каждой емкости каждого разбавления и в контрольной пробе. Готовят серии необходимых разбавлений проб в соответствии с таблицей D.

Объем пробы сточной воды, см. Объем воды для разбавления, см. Этот уровень разбавления оценивают как результат. Природную воду используют для культивирования и разбавления таблица Е. Масса реактива на 1 дм дистиллированной воды, г. Воду для разбавления анализируемых объектов готовят путем смешивания указанных в таблице Е. Приготовленная вода должна соответствовать следующим требованиям: Приготовленную воду аэрируют до того, как содержание растворенного кислорода достигнет предела насыщения и рН стабилизируется.

Воду для растворения, приготовленную указанным способом, до применения не аэрируют. В настоящий стандарт не включены: Серия повторов, содержащих контрольный раствор";. Примечание 1 - Среду М4 приложение А не следует использовать в качестве воды для разбавления анализируемых проб, содержащих двухвалентные ионы металлов. Вещество ЕДТА, содержащееся в этой среде, может уменьшить их бионакопление, что приведет к уменьшению токсичности. По той же самой причине среду М4 не следует использовать в качестве воды для разбавления анализируемых проб неизвестного состава".

Полный текст приложения А приведен ниже: Маточный раствор N 1 отдельные вещества. Смешивают эти растворы и сразу автоклавируют. Хранят раствор в темноте. Маточные растворы макроэлементов отдельные вещества. Комбинированный витаминный маточный раствор готовят, добавляя витамины к 1 дм чистой воды 6.

Хранят комбинированный витаминный маточный раствор в замороженном виде в небольших количествах. Добавляют к среде непосредственно перед использованием. Структура настоящего национального стандарта.

Структура международного стандарта ИСО Методика ПНД Ф Методические указания по отбору проб для анализа сточных вод. Утверждены ФГУ "Федеральный центр анализа и оценки техногенного воздействия" Ростехнадзора, от 18 апреля г. Инструкция по отбору проб для анализа сточных вод. Отбор проб почв, грунтов, осадков биологических очистных сооружений, шламов промышленных сточных вод, донных отложений искусственно созданных водоемов, прудов-накопителей и гидротехнических сооружений.

Экологический Центр аналитического контроля, М. Электронный текст документа подготовлен АО "Кодекс" и сверен по: Текст документа Статус Сканер копия. Определение токсичности по выживаемости пресноводных ракообразных Daphnia magna Straus Название документа: Определение токсичности по выживаемости пресноводных ракообразных Daphnia magna Straus Номер документа: Стандартинформ, год Дата принятия: Определение токсичности по выживаемости пресноводных ракообразных Daphnia magna Straus.

Данный документ представлен в формате djvu. Примечания 1 При определении токсичности и токсикологических показателей анализируемых проб природных, питьевых и сточных вод, отработанных буровых растворов, водных вытяжек твердых промышленных отходов, донных отложений, грунтов и почв по методу А устанавливают продолжительность тестирования 96 ч.

Примечания 1 Емкости, используемые для приготовления питательной среды, должны быть изготовлены из стекла. Примечания 1 Для приготовления см водной вытяжки обычно требуется г сухой массы пробы отходов. Примечания 1 Для веществ трудно растворимых в воде при приготовлении их исходных растворов могут быть использованы ультразвуковые или другие устройства шейкеры для облегчения растворимости или диспергирования веществ.

Не обладает острой токсичностью Слаботоксичная Св. Обладает острой токсичностью Высокотоксичная Св. Таблица 3 - Степень токсичности проб водных вытяжек отработанных буровых растворов, загрязненных проб донных отложений Степень токсичности проб водных вытяжек отработанных буровых растворов донных отложений Значение эффективной кратности разбавления проб водных вытяжек отработанных буровых растворов донных отложений 96 ч ЭКР , разы Нетоксичные 1,0 Слаботоксичные Менее Среднетоксичные От до Высокотоксичные От до Гипертоксичные Св.

Слаботоксичные Менее до 10 включ. Среднетоксичные Менее 10 до 1,0 включ. Методы определения токсичности по выживаемости морских ракообразных. Метрологические и технические требования. ГОСТ Р Классификация опасности смесевой химической продукции по воздействию на окружающую среду. Если заменен ссылочный стандарт. Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт.

Культивационная вода, используемая для выращивания тест-организмов. Неспособность тест-организмов плавать в течение 15 с. ЭКР effective multiplicity of dilution: Свойство воды водной вытяжки, раствора вещества , обусловленное наличием в ной токсических веществ, характеризующих способность воды нарушать жизнедеятельность тест организмов. ГОСТ Р , [1 , [2] и [3]. Примечание — Если отобранную пробу воды перед тестированием требуется отстаивать или фильтровать, то отстаивание и фильтрование должны предшествовать ев замораживанию.

После вскрытия емкостей — холодильников для подготовки проб отработанных буровых растворов к тестированию срок хранения не должен превышать 14 сут. Для отбора проб сточных вод. Для отбора проб веществ используют емкости из полиэтилена, полиэтилентерефлата, политетрафторэтилена или темного стекла. Продолжительность тестирования 48 ч указана для определения токсичности и токсикологических показателей анализируемых проб веществ.

Продолжительность тестирования 96 ч указана для определения токсичности и токсикологических показателей анализируемых проб природной и сточной воды, отработанных буровых растворов, твердых промышленных отходов, донных отложений, грунтов и почв.

Весы неавтоматического действия по ГОСТ Р высокого класса точности с ценой деления дискретностью отсчета не болев 0. Кондуктометр любого типа, обеспечивающий измерение удельной электрической проводимости дистиллированной деионизированной воды в диапазоне от 0. Оксиметр любого типа, обеспечивающий измерения в диапазоне от О до Пипетки автоматические дозаторы любого типа вместимостью 0. Пипетки по ГОСТ вместимостью 1.

Колбы стеклянные конические лабораторные по ГОСТ вместимостью 0, Шпатели металлические по ГОСТ Ступки и пестики фарфоровые по ГОСТ Бумага фильтровальная по ГОСТ Пробирки стекляннью вместимостью 10 см 3 по ГОСТ Стаканы стеклянные лабораторные вместимостью Вода дистиллированная по ГОСТ Модельный токсикант — калий двухромовокислый по ГОСТ Вода для культивирования тест-организмов и разбавления объектов испытания культивационная вода по 5.

Макроводоросли например, элодея или роголистник темно-зеленый , используемые для приготовления культивационной воды. Примечание — Элодея Elodea Canadensis Rich — представитель погруженных растений, широко распространенный в стоячих водах умеренной зоны. Размножается вегетативным путем за счет образования густо облиственных боковых отростков, побегов из подземных частей корневищ или из нижних частей летних побегов. Для культивирования растения отбирают из естественной популяции условно чистого водоема о конце мая — начале июня, когда появляется много молодых, наиболее жизнеспособных растений.

У злодеи отбирают зеленые верхушечные побеги длиной 8 — 10 см. Питательная среда среда Прата или другая, например. Культивирование и подготовка к тестированию тест-организмов — см. Калий азотнокислый по ГОСТ Калий фосфорнокислый двузамвщенный 3-водный по ГОСТ Магний сернокислый 7-водный по ГОСТ Натрий углекислый кислый по ГОСТ Натрия гидроокись по ГОСТ Хлорид железа 6-водный по ГОСТ , х. Примечание — Допускается применять другие средства измерений, вспомогательное оборудование.

Чистую посуду емкости закрывают стеклянными притертыми пробками или крышками и хранят в шкафах или на полках. Водопроводную воду отбирают из крана таким способом, чтобы избежать о о загрязнения. Для этого воду спускают 15 мин. Для подготовки культивационной воды используют стеклянные аквариумы объемом 20 — 30 л. После отстаивания воду аэрируют в течение 7 сут при помощи микрокомпрвссоров.

Для культивирования Daphnia magna Straus допускается использовать также природную воду из незагрязненных водоемов например, артезианских колодцев. Периодически не реже одного раза в месяц , а также непосредственно перед тестированием. Для этого определяют среднюю эффективную концентрацию 24 ч ЭК 5С модельного токсиканта двухромовокислого калия в следующей последовательности.

При этом в каждой емкости массовая концентрация приготовленного раствора модельного токсиканта двухромовокислого калия составляет соответственно: Продолжительность тестирования — 24 ч. Для приготовления контрольной пробы используют культивационную воду 5. Анализируемые растворы двухромовокислого калия каждой концентрации готовят непосредственно перед определением физиологической чувствительности тест-организмов. Определение токсичности по выживаемости пресноводных ракообразных Daphnia magna Straus.

Способы доставки Срочная курьерская доставка дня Курьерская доставка 7 дней Самовывоз из московского офиса Почта РФ. Вода сточная очищенная А также в:. Вода питьевая А также в:. Маркировка А также в:. Пробу отработанного бурового раствора считают не пригодной для тестирования, если: Методы позволяют определять токсичность исследуемых объектов и следующие токсикологические показатели: В помещении лаборатории, где проводят тестирование: Методы определения токсичности по выживаемости морских ракообразных ГОСТ Р Весы неавтоматического действия.

Основные положения ГОСТ Р Классификация опасности смесевой химической продукции по воздействию на окружающую среду. Новорожденный или только что вылупившийся тест-организм. Примечание — В настоящем стандарте новорожденным считают организм младше 24 ч. Срок хранения проб донных отложений — не более 12 ч после их отбора до проведения тестирования. Допускается хранение отобранных проб до проведения их тестирования: Микроскоп биологический типа МБС.